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鸡产蛋下降综合征
产蛋下降综合征(EDS)是本世纪七十年代后期被发现的一种以商品产蛋鸡和种母鸡产蛋率大幅度下降，蛋质量改变为特征的一种病毒性传染病。患鸡不表现明显临床症状和病理变化，主要以群发性产蛋率下降，蛋壳异常(软壳、薄壳、沙壳、褪色、破损)、蛋体畸形为主要表现。本病可使鸡群产蛋下降10～30%(McFerran等，1977)，在产蛋高峰，产蛋量下降30～40%；蛋的破损率达38～40%(Darbyshire，1980)，无壳蛋、软壳蛋可达15%。本病既能水平传播，又能通过种禽感染垂直传播，值得注意的是由于野生或家养水禽污染而致使病毒在水禽、家鸭和鹅中广泛传播，给养鸡业造成严重的经济损失。
自1976年VanEck首次报道本病在荷兰发生，并命名为产蛋下降综合征，并于1977年分离到血凝性腺病毒(McFerran等，1977)127株以来，在北爱尔兰、英国、意大利、法国、西班牙等西欧国家都相继有所报道，给欧洲养鸡业带来很大损失，已经被欧洲列为给养鸡业造成巨大经济损失的四种主要病毒性传染病之一(Bequet,1980)。澳大利亚、南非、印度、日本、新加坡、南朝鲜及我国台湾等许多国家也都先后发生本病，并从鸡中分离到了EDS病毒。在巴西、丹麦、墨西哥、新西兰和尼日利亚，通过血清学证明发现鸡已受到感染。目前该病在世界范围内已成为引起产蛋损失的主要原因。我国于八十年代末首先发现肉用种鸡的EDS，随后，许多地区报道该病的发生并分离到相应的病原。如江苏省某县于1991年下半年的短短半年时间内，本病流行面即已涉及35.7%的乡镇(周等，1992)。
1病原学
产蛋下降综合征病原为产蛋下降综合征病毒(EDSV)，属腺病毒科(Adenoviridae)禽类腺病毒属(Aviadenovirus)。目前，已经定型的禽类腺病毒包括鸡1～12型，鸭1～2型，鹅1～3型，雉鸡1型，火鸡1～3型等。这些禽腺病毒与哺乳动物腺病毒属之间没有共同的群抗原，而禽腺病毒本身在血凝特性、致病性、抗原性、血清学特征等方面也存在着很大的差异，国际病毒分类委员会第六次报道(1995)将现有禽腺病毒分为三群，Ⅰ群禽腺病毒包括传统的从鸡、鸭、鹅及其它禽类分离获得的腺病毒，它们具有一种共同的群抗原，这类腺病毒的病原性大多尚未确定，在世界范围内广泛地存在于多种禽类的呼吸道、消化道，作为初发病原在自然条件下获得的证据往往相互矛盾，但引起鸡包涵体肝炎和引起鹌鹑支气管炎的腺病毒病原学地位已经确定：Ⅱ群禽腺病毒可以引起火鸡出血性肠炎、雉鸡大理石脾病和鸡大脾病，这些病毒具有一种与Ⅰ群禽腺病毒不同的群抗原，自然界中也存在着无病原性的这类腺病毒并可用作免疫预防；Ⅲ群禽腺病毒，这是一类与减蛋综合症有关的病毒，可从鸡、鸭、鹅体内分离获得，致病性差异很大。这些病毒虽然与Ⅰ群禽腺病毒存在部分共同抗原，但其在抗原性、DNA同源性等方面与鸡胚致死孤儿病毒(CELO，为Ⅰ群禽腺病毒的代表株)存在着明显的差异，因此有人甚至建议将EDSV单列为腺病毒科的一个属。
1.1形态结构
EDSV具有典型腺病毒形态特征，纯化病毒液负感标本电镜观察，为无囊膜病毒，中等大小，76～80±5nm，呈二十面体立体对称。衣壳共有252个壳微粒组成，其中240个是六邻粒，构成二十面体的20个面以及棱的大部分。这些壳粒呈棱柱状，宽7nm，长11nm，另外12个是五邻粒，分别位于二十面体的12个顶上。五邻粒由宽约7nm的基部和一根由基部向外伸出的纤突组成。纤突直径2nm，长约25nm。纤突顶端为一个4nm直径的球形物，它是病毒感染细胞时结合于细胞受体的部分。血凝素也在球部。在感染细胞核内的病毒粒子经常排列成结晶状。Adair等(1979)报道在被感染鸡胚的肝细胞超薄切片中，从核内看到了70～75nm的病毒颗粒；在输卵管粘膜上皮细胞核中也报道观察到了直径68～80nm的颗粒(Taniguchi等，1981)。
1.2氯化铯中的浮密度
关于EDS病毒在氯化铯中浮密度的报道存在着差别。Todd和Mcnulty(1978)报道该病毒在氯化铯梯度中分为密度1.32、1.30和1.28g/mL的B1、B2和B3三种颗粒。B1和B2具有致病性，但B1不凝集鸡红细胞，在电镜下呈轻度损伤，B2则出现凝集并无损伤，而B3则为一些空心的、破碎的，没有传染性的血凝颗粒。相反Kraft等(1979)对该病毒进行电镜观察后发现，EDS病毒在氯化铯中可分为3个条带，其中2个带密度1.32g/mL，用分级分离法无法将其分开，两者具有高度的凝集活性和传染性，形态上具有腺病毒的典型特征。另一个带浮密度为1.30g/mL，主要是已破损的微粒所组成，也具有明显的凝集活性。Yamaguchi等(1981)报道了在1.30g/mL的血凝性颗粒带和在1.33g/mL的传染性颗粒带，而Takai等(1984)发现感染性颗粒和血凝素是在1.33g/mL的一条带中，并且在1.29g/mL的一条带中也有血凝素。Zsak和Kisary(1981)解释了或至少部分解释了这种差异，他们认为EDS76病毒颗粒的浮密度和血凝性依赖于纯化病毒时所采用的方法以及是用细胞还是用孵化的胚来增殖病毒。
1.3病毒多肽
病毒蛋白质占病毒粒子的85～87%，其中内部蛋白，也即与核酸结合的核心蛋白占20%。通常腺病毒粒子有15种多肽，其中5种多肽，包括六邻粒、五邻粒基底及纤突和2个内部多肽(Ⅴ和Ⅶ)，占总蛋白量的90%以上。位于二十面体的顶角壳粒～—五邻粒的基底，每个基底上有一非共价相联的纤突，合在一起即为五邻粒。每个基底由相同的5个多肽分子组成，而每个纤突则含有相同的3个多肽分子，纤突的氨基酸保守区为底部，与五邻粒基底相连，远离壳粒的C末端，中间部分是由脯氨酸和疏水氨基酸残基组成的，含有多个重复序列，但其氨基酸组成却不保守，这与腺病毒不同血清型的抗原特异性相关。六邻粒是病毒粒子内最大的蛋白，约120KDa。病毒粒子的核心由多肽Ⅴ、多肽Ⅶ与病毒DNA非共价相联组成。每个核心含有1070个多肽Ⅶ和180个多肽Ⅴ。两者均富含精氨酸，也含有色氨酸。核心上的另一个多肽μ，仅4KDa，其精确位置和功能尚不清楚。此外，腺病毒不含脂质，纤突蛋白和某些非结构蛋白均系糖基化蛋白。在这些蛋白中，总共有2个中和性抗原决定族，分别是五磷体纤突上的γ抗原决定簇和六邻体上的ε抗原决定簇。而纤突上的γ抗原决定簇又是血凝抑制抗体的结合部位，纤突的抗血清有中和型特异性的病毒感染。
对于EDSV，目前多同意Todd等(1978)年报道的结果，即病毒有13条结构多肽，其中至少有7条与鸡腺病毒Ⅰ型的结构多肽相同，但各个研究者在进行病毒多肽组成分析时所得到的结果不尽一致。孔德迎等(1995年)报道用10%浓度的分离胶电泳时，EDS病毒WPDV205株蛋白多肽带有15条。李银等(1994年)报道用浓度为12%的分离胶电泳，则EDS四个毒株NE-4、GC2、AV～127、CAV～T1分别有12、10、17、16条带。这些结果可能是由于病毒繁殖所选用的材料，攻毒时间、纯化方法或电泳条件以及样品处理上的差异影响，另一方面，WPDV205毒株各蛋白多肽的分子量也不同于以前的报道，并且大分子量的蛋白多肽更多，是主要谱带(分别为175、141、122、109、85、15KDa的多肽)。至于EDSV中哪条多肽对应于纤突、五邻体、六邻体和其它相关结构，目前尚未见有报道，但Todd等的研究认为EDS病毒的血凝素多肽的分子量为67KDa，在SDS-PAGE中仅表现为一条带。
1.4对理化因素的抵抗力
EDS76病毒对乙醚、氯仿不敏感抗pH范围较广，可抵抗pH3-10的处理，室温下至少可以存活6个月。加热、70℃20min或60℃30min可灭活该病毒，但其在56℃3h仍保持感染性。该病毒在单价而非双价阳离子中稳定。经0.3%甲醛处理24h或0.1%甲醛处理48h可完全灭活。
1.5血凝性
EDS病毒含有红细胞凝集素，能凝集多种禽类如鸡、鸭、鹅、鸽、火鸡和孔雀的红细胞，但不凝集大鼠、家兔、马、绵羊、牛、山羊、猪等哺乳动物的红细胞。因而可利用该血凝特性在血凝抑制试验(HI)中具有的高度的特异性，来检出鸡群中的特异性抗体，而其它禽腺病毒则主要凝集哺乳动物的红细胞以相区别。EDS病毒及其它腺病毒的这种血凝作用主要是依靠病毒的纤丝与红细胞表面相应受体经结合时产生的，因而不同的病毒凝集红细胞的种类有差异。
EDS病毒的血凝素(HA)具有较强的抵抗力，HA滴度在56℃16h仅降低4倍可维持4d，60℃30min不灭活，4℃可以长期保持活性不变。37℃1h可抵抗胰酶、2—巯基乙醇、EDTA、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶和0.5%甲醛，但对高磺酸钾、0.5%戊二醛敏感。据S.Takai等(1984年)报道，提纯的可溶性HA易被胰酶、α-胰凝乳蛋白酶和木瓜蛋白酶破坏。α-胰凝乳酶能破坏消毒在鸡红细胞上的HA受体，并且该作用受甲醛和戊二醛的影响，而胰酶和神经氨酸苷酶则没有这种作用。EL.mishad(1986)等报道禽腺病毒Ⅰ型的这种特性则不受甲醛的影响，这表明鸡红细胞表面EDS的受体是含有蛋白成分的，而其它腺病毒的红细胞受体可能是以碳水化合物为主。
1.6病毒的培养和增殖
EDSV最适合于在鸭胚肾细胞、鸭胚肝细胞和鸭胚成纤维细胞中生长；在鸡胚肝细胞中也能很好地生长，在鸡肾细胞中次之，在鸡胚成纤维细胞中生长较差，在火鸡细胞中生长不良，在多种哺乳动物细胞中培养不能生长，一般检测不到病毒的复制。鹅细胞培养物中病毒生长可达到高滴度。在鸡肝细胞中，病毒高峰滴度出现的时间，在细胞内分48h后，在细胞外为72h。当接种到7～10日龄鸭胚和鹅胚尿囊腔内时，病毒生长良好可达很高滴度，为1∶6000～1∶32000，甚至更高，并可使鸭胚致死。作者等分离到一株EDS病毒，在鸭胚适应后血凝价达1,000,000。而接种在5～7日龄鸡胚卵黄囊，可使胚体萎缩，出壳率降低或延缓出壳，但尿囊液中难以检测到病毒的增殖，HA滴度很低或无。
1.7常见毒株及其血清学鉴定
EDSV自1976年报道以来，现已分离出多株毒株，如127株(爱尔兰，1977)、BC14株(英格兰，1978)、D61株(英国，1980)、B8/78株(匈牙利)、KE-80、ME-80、Jap-1、H-162株(日本)、E-77(意大利)、38、77株(法国)、AD株(朝鲜)、TN株(中国台湾)等。其中最早分离的是127株和BC14株。127株是从鸡输卵管、粪便、鼻腔和咽部粘膜中分离到的。BC14株是从患鸡白细胞中分离发现的，作者实验室曾从软壳蛋蛋白中分离到一株病毒EDS-H91—1。经各国学者的比较研究表明，EDSV分离株均为同一种血清型。这种血清型的鉴定是根据中和试验来确定的，即若一个血清型与另一个血清型不存在交叉反应，或同源∶异源滴度指数在双向大于16，则可定为一个新型，若同源∶异源滴度指数在8～16之间，病毒血凝素不相关(HI试验无交叉反应)，或存在真正的生物物理或生物化学差异，则也可以定为一个新的血清型，否则为同一血清型。
1.8部分分子生物学特性
用3H-胸腺嘧啶标记和碘脱氧尿嘧啶抑制试验表明EDS76病毒含有DNA，其分子量为22.6×103KDa，EDSV基因组为双股DNA，全长约34.2kb，与禽腺病毒群明显不同。Zakharchuk等(1993)用Southern印迹法研究发现，EDSV-127株与牛腺病毒DNA具有同源序列，而与CELO病毒DNA无同源性。目前，国内外均已建立了EDSVDNA的基因文库并对其部分序列进行了测定，如国内张兹均等(1994年)曾报道EDSV核酸重组质粒TEZP3，p3的318bp序列分析，孙淑芳等(1995年)也对用HindⅢ和PstⅠ两个酶切所得的一个1.6kb片段进行了序列测定，但报道时仅测出了两端的970个碱基序列。
由于腺病毒是研究真核基因表达的良好模型，并且可用于构建腺病毒载体，而且与其他病毒载体比较，腺病毒基因组DNA较大，非必需片段较大，能容纳较长的外源DNA片段，因而是目前研究的热门课题，对其分子生物学的研究也已取得了一定的进展：
1.8.1病毒基因组DNA结合着病毒编码的某些蛋白质。它们主要是三个富含精氨酸的碱性多肽，其中含量最大的多肽Ⅶ(17KDa)，每个病毒粒子约为1000拷贝；其次是多肽Ⅴ，每个病毒粒子约含200拷贝，还有一个次要蛋白质，分子量约为4KDa。有人认为，这些多肽与基因组DNA紧密结合，形成类似于染色体样的结构。
1.8.2腺病毒基因组的5′端存在着末端蛋白，在腺病毒基因组每条链的5′端，结合着一种由腺病毒编码的蛋白质，即末端蛋白(TP)。末端蛋白的大小为55KDa，其前体pTP为80KDa。末端蛋白与腺病毒的感染性有关，因为带有末端蛋白的病毒DNA可使其感染性提高100倍。
1.8.3腺病毒基因组具有末端倒置重复序列(ITR)。ITR的研究对研究病毒基因组DNA的同源性、病毒复制及病毒种系之间的遗传关系均有重大意义。所有腺病毒DNA都具有40～200bp末端倒置重复序列，重复的次数和长短随病毒型和株的不同而异，并且与病毒传代次数有关。近年来，主要采用比较法和最大可能性方法来研究各禽腺病毒之间及禽腺病毒与其它动物腺病毒的关系。Shinagawa等(1983等)测定了EDS病毒与人工10型腺病毒(ADV10、牛的Ⅰ型腺病毒(BAD1)和3型腺病毒(BAD3)以及犬的2型腺病毒(CAD2)的ITR序列，提出它们的序列长度分别为52、160、195、196bp，他们经过分析，认为ITR从末端算起位于第10～13的序列ATAAT对所有腺病毒都是守恒序列。另外，也有学者报道每一个ITR可分为AT富集区和GC富集区两部分，其中AT富集区一般位于病毒DNA分子的最末端。
1.9酶切分析及酶切图谱随着现代分子生物学技术的发展，研究者们采用酶切分析来作为病毒分型研究的重要手段。Zsak等(1984年)用BamHⅠ和HindⅢ两个限制性内切酶对代表11个血清型的17个禽腺病毒(FAV)基因组进行酶切分析，并通过交叉中和试验来证实酶切分析结果。根据FAV基因组结构的特性将其分成了A、B、C、D、E五群，群与血清型及设定名(文章中命名)的关系如下表：
群： A A B B C C D D D D D E E E E E E
血清型： 1 1 5 5 4 10 11 2 2 3 9 7 6 ? 8 8 8
设定名：CELO 112 340 TR-22KR-5C-2B 380 685 SR-48 SR-49 A-2 YR-36 CR-119 X-11 H-6 TR-59 764
Zsak等(1981年)用ECORⅠ、BamHⅠ、HindⅢ、Bg1Ⅰ、Bg1Ⅱ、HpaⅠ和PstⅠ酶切EDS病毒(B8/78株)的病毒基因组DNA，得到48个片段，通过分析这些片段得出该EDS病毒DNA的ECORⅠ酶切图谱顺序为BADC(自左至右)。而Zakharchuk等(1993)报道EDS76病毒127株的ECORⅠ酶切图谱顺序为CADB(自左向右)。此外，他们还用8种限制性内切酶(ClaⅠ、SaⅠ、SmaⅠ、XbaⅠ、XhoⅠ、SphⅠ、PstⅠ、ECORⅠ)对EDS病毒(127株)DNA酶切、电泳并通过计算机程序确定片段长的长度，从而建立了这8种酶的酶切图谱。其后，国内王泽霖等(1994年)报道国内四株分离毒病毒核酸与AV-127毒株进行酶切分析比较，发现它们之间没有差异，只有一株分离毒的HindⅢ酶切消化物中一个片段比相应(C片段)的AV-127毒株大0.2kb。但段玉友等(1995年)报道的地方分离株H91毒株与AV-127毒株比较发现有点差异，虽然H91毒株在病毒形态、培养特性和血凝性等方面与AV-127毒株十分相似，且从血清学上也不能完全与AV-127株区分。
尽管EDS血清型鉴定仅有一个血清型，但Todd(1988年)等通过限制性内切酶分析比较了13株EDS病毒，发现其基因组也可能存在差异。这13株中，1株是从澳大利亚小鸡分离的，通过限制性内切酶ECoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ、PstⅠ和PvuⅢ分析发现该分离株不同于其它12株，再用HaeⅢ、HhaⅢ、TaqⅠ酶切这13株病毒DNA，发现英国和比利时于1976～1987年间分离的9个雏鸡分离株病毒的DNA是一致的，它们与英国从雏鸭中分离的3株有差别，澳大利亚株的基因组DNA末端少了4×102bp的片段，在碱基序列上也与其它12个分离株有所不同。基于此，他认为可将EDSV分为3个基因型，一组包括从欧洲感染鸡中分离的病毒株，一组是英国从鸭中分离的一些病毒，另一组是澳大利亚从鸡分离的一株病毒。
到目前为止，分离的EDS病毒有鸡源的、鸭源的和鹅源的，说明EDS病毒可在鸡、鸭、鹅等之间感染传递，并可能因为宿主的不同使病毒的基因在结构上产生相应变化。如王泽霖(1994年)报道了一株在病毒形态、培养特性和血凝性以及血清学等方面与AV-127株十分相似的鹅源分离株Y81G4(作者实验室提供)，并对其进行了限制性酶切分析，发现二者在分子水平上差异甚大，该分离株对6种内切酶的酶切位点，包括片段数，各片段的kb值和分子量估算值均不同于AV-127标准株A.Brotha(1982年)报道认为74年前在鸡血清中无EDS抗体，由于鸡使用了鸭源疫苗，才将病原传染给鸡导致了EDS在鸡中爆发进行。这种推测通过很多鸭群中存在抗体，并从正常鸭分离出EDS病毒而很快得到了证实。
1.10病毒复制
EDS病毒为核内复制，这点与属于亚群A的禽腺病毒复制模式相似。在感染的细胞培养物中，在输卵管伞、输卵管蛋壳分泌腺、壶腹部蛋壳分泌腺、狭窄部和鼻粘膜上皮中及实验感染鸡的脾脏，经苏木精-伊红染色后可见到核内包涵体。在超薄切片中，核内的病毒颗粒和Ⅰ—Ⅳ型腺病毒包涵体很明显，这与其它禽腺病毒十分相似。
腺病毒通过其纤突球部与敏感细胞膜上的特异性受体结合后，即开始了感染过程。结合后的病毒，或依靠细胞的吞饮作用，或直接侵入细胞。进入细胞浆内的病毒立即脱衣壳，五邻粒发生解离，进而降低了衣壳的稳定性，其它六邻粒及其相关蛋白也发生分离。裸露的病毒核心体通过核膜上的空隙进入核内，或释放出DNA进入核内，这个过程可在1～2h内完成。
病毒DNA在核内复制之间，病毒基因组的早早期和早期mRNA即被转录。这些前期mRNA在感染后1～2h即开始形成，2～3h可以在细胞浆的核糖体上出现并翻译成数种早期蛋白。胞核内的前期mRNA为高分子结构，但胞浆内却主要是以16S和23S为主的mRNA。研究表明，在E1A启动子控制下的RNA合成最早可发现在病毒感染后1h。而E1B、E2B、E3和E4的转录发生在感染后1.5-2.0h。E1A、E3和E4转录在感染后3～4h达到高峰，然后开始下降，而E1B和E2B在感染后6～7h达到高峰，然后开始下降。在DNA复制一开始，所有早期转录可增加3～10倍，这可能反映了DNA模板数量的增加。在感染的中期，也就是感染后8～12h，Ⅸ和Ⅳa2启动子最为活跃。主要晚期启动子(MLP)和E2区的E2A的第二个启动子控制的转录在这一时期开始增加。MLP在18h达到高峰。其转录的RNA约占全细胞RNA的20～30%，并至少在10h内保持稳定。
在感染后7～8h，DNA合成的同时，后期mRNA开始转录。这些mRNA比较稳定，它们是翻译成病毒粒子蛋白质的mRNA。构成病毒粒子的五邻粒、六邻粒和内部蛋白，都在DNA复制以后合成。六邻粒和五邻粒蛋白质的合成量比构成病毒衣壳的蛋白质的量要多得多。但合成内部蛋白的量并不比组成病毒内部蛋白的实际需要量多。多余蛋白质的机能还不清楚，但其中肯定包括T抗原和P抗原。病毒的DNA复制为半保留复制，始于两条链的任何一端C处，后者与前体末端蛋白(pTP)结合，成为pTP-dCMP复合物，作为引物。pTP-dCMP复合物有效的合成则需要其它二种病毒蛋白，一是病毒编码的RNA聚合酶，一是病毒编码的DNA结合蛋白，此外还有NF-1蛋白，它的结合位点是TGG(N)6-7GCCAA。在感染后6～8h，病毒DNA即在核内复制，18～20h达到高峰，然后开始晚期转录，晚期mRNA也引起胞浆核糖体进行翻译，再回到核内进行包装，包装时先形成一个原衣壳，这大约在衣壳蛋白产生后2h之后完成。复制的DNA进入原衣壳内，形成成熟的毒粒，再释放到细胞外，释放期可长达13～17h。根据测定，DNA的生产量常是最终进入子代病毒粒子的DNA的10倍。组成病毒粒子，似乎需要高浓度的核酸和蛋白质。但病毒DNA转录物(mRNA)译制病毒特异的早期蛋白质，是病毒DNA复制所必需的，而子代DNA的产生，又为后期转录物和后期病毒蛋白的形成创造条件。虽然腺病毒的DNA是在细胞核内复制和转录的，但是病毒蛋白是在胞浆的聚核蛋白体上生成的。后期蛋白质主要就是病毒粒子的结构蛋白。通常是在形成多肽链后就迅速运入细胞核内，以便与已在核内生成的子代DNA组装成成熟的病毒粒子。成熟的病毒粒子经常在感染细胞核内形成结晶状聚积，在细胞崩解时释出于细胞外。
在腺病毒的繁殖周期中，DNA复制前为早期，DNA复制后为晚期，早期表达蛋白的主要功能是调节基因表达和DNA复制，晚期蛋白主要是毒粒成分和病毒包装蛋白。一般也可将病毒复制周期分为早一早(极)期、早期、中间期和晚期，各指感染后0～2、2～6、6～12、12～36h。病毒感染后15～17h，感染细胞内的病毒量增高。在感染后20h左右，细胞外开始出现病毒，病毒量于感染后25～36h达高峰)。
由于腺病毒对敏感细胞的吸附效率较低，且因病毒的释放也不完全，因此细胞培养物在接种病毒以后，经常需待7～10d，甚至2～4周以后才能出现比较明显的细胞病变。腺病毒增殖时，感染细胞的有丝分裂被阻断，糖酵解增高，酸产量增多。因此感染腺病毒的细胞培养液变酸(这与感染其他病毒的细胞培养物不同，在这些细胞培养物内，当感染细胞破坏时，pH变碱)。此时，感染细胞变圆，且集聚成不规则的葡萄患状。胞核内出现单个的呈玫瑰花样的大型嗜碱性包涵体。胞核增大，有时还可看到嗜酸性包涵体，包涵体内聚集有蛋白质和病毒粒子结晶。
2流行病学
尽管发生产蛋下降综合征的都是产蛋鸡，但EDSV的自然宿主可能是鸭和鹅，在检查的家鸭和家鹅中普遍存在抗体，据报道，在家鸭、家鹅、俄罗斯鸭和白鹭、加拿大鹅和凫、海欧、猫头鹰、鹤、天鹅、北京鸭、珠鸡、鹌鹑中广泛存在EDS抗体、A. Bartha等(1982年)对1964～1975年间采集的禽类血清检测，结果在60%的鸭，59%的野鸭、70%的鹅和20%的银鸥血清中检出EDSHI抗体。目前，已从健康的家鸭中分离出了病毒(郑等，1992)。从发病鸭也发现了病毒，但用分离物不能复制出该病。Bartha(1984年)从表现产蛋下降和严重腹泻的鸭中分离了一株病毒，并且Liu(1986年)认为，EDS在鸭中可以引起生产下降和蛋壳变粗糙和变薄。在鹅中EDS感染十分普遍，但实验性感染雏鹅和成年鹅既不发病也不影响产蛋。A.Zanella等(1980年)试验证明，EDS病毒除可使不同品种的鸡和鸭感染外，鹅、野鸡、珠鸡、火鸡和鹌鹑也可产生不同程度的抗体或排出病毒。鹌鹑只排出病毒但不产生抗体。Mandelli(1978年)报道，在感染鸡场生活的麻雀，具有很少或很低的抗体滴度(最高1∶20)。Kaleta等(1980年)对西德的野禽进行血清学调查时，从1975年的一只猫头鹰血清中查出EDS病毒抗体。
在人工感染时，各品种家鸡均同样易感，但在自然感染时，肉鸡和产褐壳蛋的重型鸡较产白壳蛋的鸡受到感染更严重。任何年龄的鸡均有易感性，但产蛋高峰的鸡最易受感。幼鸡感染后不表现任何临床症状，血清中也查不出抗体，直到开产以后，血清才转为阳性。这是因为这些鸡进入产蛋期后，受应激因素影响(如激素分泌紊乱等)，体内的病毒可重新活化并致病。有人曾在7周龄鸡中检测到抗体，抗体的出现和发病并无明显相关性。实验感染鸡中，病毒在内脏增殖及排泄，其病毒量随年龄增大而下降。成年鸡组织中带毒大约3周，粪便大约1周。EDS的流行特点是：病毒的毒力在性成熟前的鸡体内不表现出来，产蛋初期的应激反应，致使病毒活化而使产蛋鸡罹病，6～8月龄母鸡处于发病高潮。Bowendale(1977)对27群自然发生EDS的观察表明，主要发生在26～22周龄的鸡群，其中19群发生于29～31周龄鸡群，较少发生在35周龄以上的鸡群。
EDS的传播途径，既可水平传播，又可垂直传播，但主要传播方式是经受精卵垂直传播，其感染胚的数目虽不多，但传播是很容易发生的。McFerran等(1978年)证明被感染鸡可通过种蛋和种公鸡的精液传播。Darbyshire(1980)报道，自感染母鸡所产卵孵出的雏鸡肝脏回收到有感染性的病毒。有人从鸡的输卵管、泄殖腔、粪便、咽粘膜、白细胞、肠内容物都分离到EDS病毒，可见病毒可通过这些途径向外排毒，经水平传播使其它鸡感染。作者实验室分别采用H91～1和Y81G4两株EDS分离株通过滴鼻、口服和肌肉注射SPF产蛋母鸡、伊莎蛋鸡，在感染后第3至20d的不同时期分别扑杀感染鸡，应用夹心ELISA和血凝试验直接检测病料及鸭胚分离病毒，试验结果表明，SPF蛋鸡和普通蛋鸡的咽喉部，卵巢、输卵管(蛋白分泌部、峡部、子宫部)都带毒。最早在感染后第3d即能检出病毒，感染后6～15d检出率最高。输卵管峡部是检测和分离病毒的最佳部位。Darbyshire(1980)对雏鸡经结膜和口腔人工感染，复制出本病。 Mclracken(1978年)采用口腔人工感染，7d后蛋壳颜色变浅，9d后出现软壳蛋和无壳蛋。Loupal(1982年)报道，60只产蛋鸡经口腔感染127株病毒后，产蛋量下降0.7%，7d后出现抗体，10～11d后产畸形蛋达到高峰。在日本对洛岛红产蛋鸡接种Jap-1株后5～7d，在母鸡各器官检出病毒，其后较难检出病毒，接种后10～14d，自母鸡子宫及输卵管峡部上皮细胞经荧光抗体检查出现阳性颗粒，接种80d后开始产畸形蛋。火鸡经鼻腔和口腔接种127株后，不出现任何临床症状，但1周后可查到HI抗体，28周后HI抗体明显升高，很易检测到。由上可见，EDS病毒的水平传播已得到证实，但本病的水平传播呈缓慢且间歇性，在一幢笼养鸡舍里要传遍需11周时间，Vasic等(1980年)发现青年鸡舍发生典型EDS，另一鸡舍一直没有发生，相邻的鸡舍甚至隔一铁丝网的鸡群也不发病，这表明EDS病毒的传染性并不算强，而在铺有垫料的平养鸡舍中传播速度要快得多。在实验条件下，病毒传播速度依赖于感染鸡的数目。由于病毒可从咽喉粘液和粪便中排出，所以水平传播常由于与感染性的粪便接触引起。此外，由于运输时使用未充分消毒的车船笼具等，以及当病毒血症时使用有病毒污染的注射器械为健鸡采血或接种注射也常易传播本病。
3发病机理
经口实验感染成年母鸡后，病毒在鼻粘膜进行一定量的复制，可形成毒血症，感染后3～4d病毒在全身的淋巴组织，尤其是在脾和胸腺中复制。另外，输卵管伞部总要受感染。感染后7～20d，在输卵管狭部蛋壳分泌腺有大量病毒复制，而在输卵管的其它部位要少得多。输卵管蛋壳分泌腺明显的炎症反应与此有关，病毒作用于子宫腺上皮，使子宫粘膜腺上皮的“钾钠泵”受到破坏，产无壳蛋的鸡子宫内pH值为6±0.2，而对照鸡为6.4±0.2，酸度升高导致钙的溶解和蛋壳形成障碍，并致蛋壳异常。与普通腺病毒不同，EDSV在肠粘膜并不复制，而粪便中出现的病毒可能是由于输卵管渗出液污染所致。
4临诊症状和病理变化
EDS感染鸡群没有什么明显的临诊症状，常常最初的症状是蛋壳退色，接着出现软壳蛋或无壳蛋。薄壳蛋的外表粗糙，一端常呈细颗粒状如砂纸样和端蛋壳有粗颗粒，褪色如白灰，灰黄粉样，蛋清变稀，蛋黄变淡，蛋清中可能混有血液等异物。如果弃掉有明显异常的蛋，对受精率和孵化率没有明显影响，对蛋的质量也无长期影响。但也有人认为受精率正常，但孵化率则明显降低，并出现多量生命力弱的雏鸡，死胚率由正常的6～8%增至10～12%。如果鸡在产蛋后期受到感染，对鸡群施行强制换羽将会使产蛋恢复正常。产蛋量下降通常发生于25～35周龄的产蛋高峰期，此时出现群体性产蛋下降，产蛋率可比正常下降20～30%(长友邦夫，1984)，甚至50%(A.Zanella,1980)，持续期为5～10周左右，产蛋恢复十分缓慢。持续的时间可能与病毒传播的速度有关，有些鸡群几星期内就恢复到正常。Pejkovski等(1982年)对EDS发病群统计，发病第一周正常蛋占产蛋量66.1%，而变形蛋占33.9%；第二周正常蛋占50.6%，变形蛋占49.4%；第三周正常蛋为60.4%，变形蛋占39.6%；第四周正常蛋上升到73.9%，变形蛋减少到26.1%；第五周开始渐渐恢复。EDS所致的退色薄壳蛋、脆壳蛋往往出现在产蛋减少前24～48h，这一特征症状有助于将本病区别于其它病因引起的产蛋减少症。目前，多数学者认为EDS病毒对鸡的生长无明显影响。
患病鸡群外表上基本还是健康的，但开产期可能推延。如仔细检查常可发现一些轻微的症状，如暂时性腹泻、减食、贫血、冠髯发绀、轻度的呼吸道症状和精神呆滞等。自然情况下本病对育成鸡并不致病，口服感染易感的1日龄雏鸡，并到7日龄前后出现精神萎顿和腹泻可使2周龄内鸡群死亡率增加。
在自然流行中，EDS没有明显的特征的肉眼病变，仅见病鸡的肝、脾和肾轻度肿胀，轻度肺炎有些病鸡卵巢和输卵管萎缩，人工感染的病鸡常见子宫粘膜水肿，管腔中含有白色渗出物有些则见卵巢萎缩。在子宫、输卵管峡部、阴道上皮细胞中可见核内包涵体，输卵管淋巴细胞浸润等病变。实验感染SPF鸡后，子宫出现淋巴滤泡，其它器官无明显变化，与商品鸡实验感染病理变化不同(McFerran，J.B.1984)。Moorthy(1987)用127株病毒感染来航鸡，最典型的病理组织学变化是肺、肝、肾及腺胃出血和淋巴样细胞积聚。生殖器官只见输卵管萎缩，卵巢纤维化或有时出血、卵泡软化，其它病变不明显。
鸭和鹅的临床症状并不十分明显，但也有感染鸭出现产蛋下降，蛋壳粗糙变薄、严重腹泻等报道。
5诊 断
众所周知，多种因素可以造成密集饲养的鸡群发生产蛋下降，因此，在诊断时应注意综合分析和判断。在饲养管理正常的情况下，某个鸡群如出现产蛋率突然下降，异常蛋很多，尤其是褐壳蛋品种鸡在产蛋下降前一、二天出现蛋壳褪色，变薄、变脆等现象，剖检见有生殖道病变，临诊上也无特异的表现时，就应考虑是否存在EDS病毒感染。根据病史和症状作出初步诊断，另尚需进一步作病毒分离鉴定和血清学检查，方能确切诊断。
5.1病原学检查分离病毒的病料可以从患鸡的输卵管、变形卵泡、无壳蛋、泄殖腔、鼻咽粘膜、粪便等采集病料，经过常规的灭菌处理后，接种在鸭胚肾或鸡胚肾细胞上，孵育数天后观察细胞病变及核内包涵体，并用血凝及血凝抑制试验进行鉴定。接种10～12日胚龄鸭胚尿囊腔，可使部分鸭胚致死，尿囊液有较高的凝集滴度病毒液。从EDS血清阳性鸡中，病毒分离率约为33%，从产卵异常的鸡群中，分离率可达60%。EDS病毒在鸭胚肾细胞。鸭胚肝细胞和鸭胚成纤维细胞中生长可获得最高滴度，也能在鸡胚肝细胞和鹅胚成纤维细胞生长良好。在哺乳动物细胞中几乎不能生长。鸡胚或鸡胚成纤维细胞不适用于分离病毒。如用鸭胚细胞培养传代不能低于2代，而用鸡胚细胞培养病毒，至少需传5代。反复传代一方面是由于初次在鸡胚细胞上分离时病毒生长不良。另一方面是由于鸡排毒常呈间歇性，且滴度不高。接毒后出现死胚或细胞病变尚不足以证明为EDS病毒。必须将每次传代后的尿囊液或细胞培养上清液作血凝性检查(用0.8%鸡红细胞悬液)或用抗EDS病毒的免疫血清标记的荧光抗体检测细胞生长物。
5.1.1病料采集与处理用无菌手续采取病鸡的输卵管和卵巢病料。将病料磨细加入灭菌PBS或Hank's液作1∶5～1∶10稀释，经3000转每分离心30min，取上清液加入1/5分析纯氯仿，在室温中振荡15min，经2000～3000转每分离心20min，吸取上清液按每毫升加入青、链霉素各1000单位，混匀后置37℃温箱作用30min，经无菌检验后，冻结保存作为病毒分离材料。也可取同一鸡群的数个软壳蛋、畸形蛋，用无菌手续吸取蛋清作混合样品，按蛋清量加入1/5分析纯氯仿，其他方法同上。
5.1.2鸭胚接种用6～10个10～12日龄鸭胚或6～10个12～14日龄鹅胚，每胚绒尿腔接种0.2mL，置37℃温箱继续孵化，观察5d。48h内死的胚弃去。胚胎不死亡，于120h将其全部放置4℃冰箱内冷却致死，用无菌手续收获绒尿液作为病毒鉴定材料。
5.2血清学检查
5.2.1红细胞凝集试验
5.2.1.1红细胞凝集试验EDS病毒含有红细胞凝集素，能凝集鸡、鸭、鹅、火鸡等的禽类红细胞，但由于本病毒和新城疫病毒均能凝集鸡红细胞，虽然分离病毒时病料用氯仿处理，可减少干扰病毒的分离，但还需作凝集试验鉴定。用1%鸡红细胞和1%人类“O”型红细胞分别在凝集板4个孔滴一滴，于两种红细胞孔内各加入一滴被检绒尿液毒，另二孔内另入一滴生理盐水作为对照，混匀后置室温中放置20～30min观察结果。鸡红细胞凝集，而其他阴性，可确定为本病毒。如两种红细胞均出现凝集，而对照阴性，可以认为有新城疫病毒存在。
5.2.2血凝抑制(HI)试验在检查本病的各种血清学试验中，HI试验为首先的方法。抗原可由鸭胚尿囊液或细胞培养物制备。HI试验时用4单位HA抗原，待检血清从1∶4起作培比稀释，采用0.8%鸡红细胞胞悬液。以完全抑制凝集的血清最大稀释度为该血清的HI效价。HI试验既可用来调查鸡群的感染情况和监测抗体水平，也可用于对所分离病毒的鉴定。鸡感染病毒后最早在7～10d出现HI抗体，至2～3周时达到高峰，效价可达1∶1280以上。目前HI试验多采用微量法。
5.2.3琼脂扩散(AGP)试验抗原的制备可将种毒通过尿囊腔接种12～14日龄鸭胚，接种后96h收集鸭胚尿囊液，经3000r/min离心30min，取上清，加入甲醛使最终浓度为0.2%。置38℃温箱中作用48h后，以4000or/min超离2h，弃上清，取沉淀物，接原液量的1/10加入灭菌生理盐水，用注射器充分吹打溶解，作为琼扩抗原。试验时在100mLPBS(pH5.6-6.4)中加入氯化钠3g、琼脂糖1g、10%硫柳汞0.1mL，充分煮沸后，每个平皿注入18mL，待琼脂自然凝固后，打孔补底，中心孔加抗原，周围孔滴入待检血清和阴、阳性血清对照，置37℃温箱中，保持一定湿度，经24～48h观察结果。抗原与待检血清间出现特异性沉淀线者，判为阳性。
5.2.4病毒中和(VN)试验EDS病毒能致细胞病变，并产生核内包涵体，这种作用可被相应的抗血清中和而消除，故可采用本试验检验EDS抗原或血清抗体。
5.2.5免疫荧光(IF)法免疫荧光技术可用于本病的诊断。Baxendale(1978)采用荧光法确定了EDS病毒与其他禽腺病毒有其同抗原成分。Adair(1978)采用荧光技术证明，EDS病毒主要定位于感染细胞的细胞核。Mockett等(1984)报道予以证实。
5.2.6酶联免疫吸附试验(ELISA)此法具有敏感性高、特异性强、快速准确的特点，较HI试验更敏感，如果选用合适的抗鸡球蛋白标记抗体或EDS单克隆抗体，ELISA就能用于检测EDS病毒或抗体。Mockett等以D61毒株免疫Balb/C系小白鼠，取其脾细胞与NS1-AGA-1原发性骨髓瘤细胞融合，成功获得了能产生中和性单克隆抗体杂交瘤细胞。作者实验室于1990年亦成功研制出抗血凝集单克隆抗体的杂交瘤细胞株，建立的单抗介导的夹心ELISA用于EDS带毒量检测。
以上介绍的几种血清学诊断方法，均可用于EDS的诊断，各有优缺点。免疫荧光法至少和BI法一样敏感，免疫琼扩法，虽没有HI敏感，但易于操作。采用ELISA、AGP、HI对EDS病毒感染的检测结果证实，ELISA比AGP敏感，与HI结果相似，但ELISA可采用两种抗原包被，简化了禽腺病毒感染的鉴别诊断。Piele(1985)利用HI、ELISA和AGP检测实验感染鸡血清和蛋黄中不同时间的EDS抗体，认为用氯仿提取的蛋黄适合于HI、ELISA和AGP试验。然而，当鸡受到多种血清型腺病毒感染并产生了高水平腺病毒群抗体时，在ELISA、FA和DID(双向免疫扩散试验)试验中呈现阳性反应，而在HI或SN试验中则不出现。此外，ELISA与IF法特异性均不如HI试验，故在生产现场和口岸检疫时主要采用HI试验。
5.3核酸检测技术近年来，诊断减蛋综合症的基因探针和聚合酶链反应(PCR)等方法均已相继建立，国内不少学者也在这方面进行了大量的研究工作。
5.3.1基因探针法 通过基因克隆法获得不同病毒的全基因或亚基因片段，可以利用放射性核素和非放射性标记法制成探针。利用双链DNA可解链成为单链，同源性核酸间可以退火并杂交的特点，可用于检测标本中有无相应的病毒基因。目前该法应用甚为广泛。段玉友等(1995年)H91～1株病毒，经酶切克隆2.0kb的片段于载体中，以digoxigenin标记作为探针。在dotblot中该探针不与鹅胚尿囊液核酸抽提物，鸡马立克氏病病毒(MDV)DNA、鸡传染性贫血病病毒DNA、SPF鸡基因组DNA等核酸反应，而与三株EDSV(AV-127、H91～1和Y81G4株)DNA呈阳性反应。人工感染24h即可用该探针从产蛋母鸡和雏鸡泄殖腔棉拭子样中检出EDS病毒DNA，在感染后35d仍能从部分感染鸡样品中检出病毒DNA。张兹钧等(1995年)提取EDS病毒DNA后用5种限制性内切酶进行酶切图谱分析，得到了5种不同的EDS病毒DNA片段的重组质粒，将其中插入片段约0.4kb的重组质粒经光敏生物素标记后作为探针检测EDS病毒感染的鸭胚尿囊液提取物，证实了该针对EDS病毒有特异性强、敏感性高(至少可检出1pg的EDS病毒DNA)的优点。同时他们还对常规的核酸杂交试验中的样品处理，预杂交及洗涤等程序进行了改进，使从采样开始，在两天之内就能得到试验结果。
5.3.2聚合酶链反应(PCR) 由于EDSV为垂直传播，往往在产蛋期以前呈隐性感染而不表现症状，并且此时抗体检出率也较低，因而在一定程度上制约了对该病的早期预防诊断。PCR技术因为能快速扩增特定核酸片段，经琼脂糖凝胶电泳后即可观察到核酸条带，因此具有高敏感性，特异性、简便、快速等特点。现已被医学临床上认为能推广采用的病毒检测法。
现在研究者们也将这一技术用于对EDSV的检测，并逐步建立了这一方法。孙淑芸等(1995年)根据已测得的EDSDNA序列，设计出一对EDS特异性引物，对提纯EDS病毒液、鸭胚感染后尿囊液及实验感染鸡的粪便、蛋、输卵管样品，进行了PCR扩增，结果能特异地检出EDS病鸡的粪便、输卵管、蛋清样品中的病毒，而不能扩增新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性支气管炎病毒，包涵体肝炎病毒等对照样品。且PCR法较常规血清学法更灵敏。他们还发现，EDS人工发病鸡的输卵管伞部受到感染，在输卵管伞狭部蛋壳分泌腺有大量病毒复制，因此PCR检出率达100%，而病毒在肠粘膜上不复制，所以粪样中PCR检出率相对较低，提示检出的病毒可能为输卵管分泌液污染所致。异常蛋病毒检出率也很高，这说明异常蛋带毒量较高，产出的正常蛋一定也带毒，由此造成病毒垂直传播。此外，他们认为有些经卵感染的雏鸡在它们进入产蛋之间不能产生抗体，但病毒即已在输卵管繁殖，血清学方法此时检不出抗体，而PCR则可以在输卵管中检出病毒，这为病毒的早期检测、根除该病提供了条件。张兹钧等(1995年)根据对EDSV基因组部分序列的分析，设计了两对引物，均能扩增出一个特异片段，并且用病毒分离方法证实了PCR对野外病料(肛拭子、血液和软壳蛋等)的检出结果是可信的。经比较发现，用PCR和HA同时检测EDS感染的鸭胚尿囊液，PCR至少比HA敏感2个稀释度，即4倍，而前者只取了1μl的样品，后者要有50μl样品，因此实际上PCR要比HA灵敏200倍以上。用PCR和核酸杂交试验同时检测EDS-DNA的实验表明，前者可检测10-7pg的EDS-DNA，而后者只能检测1pg，因此PCR至少比核酸杂交试验敏感4万倍。
6预防和控制
由于EDS尚无有效的治疗方法，只能从加强管理、免疫、淘汰病鸡等多方面进行综合防制。
6.1管理措施
无EDS的清洁鸡场(群)，一定要防止从疫场(群)将本病带入。不要到疫区引种，因已证实，本病可通过蛋垂直传播。原则上是：要引种，必须从无本病的鸡场引入，引入后并需隔离观察一定时间，虽然这一点执行起来很难，但十分关键。
EDS污染鸡场(群)要严格执行兽医卫生措施。本病除垂直传染外，也可水平传染，污染场要根除本病是较困难的，必须花大力气。为防止水平传播，场内鸡群应隔离，及时进行淘汰。做好鸡舍及周围环境清扫和消毒。粪便进行合理处理是十分重要的。产蛋下降期的种蛋和异常蛋，坚决不要留作种用。加强鸡群的饲养管理，喂给平衡的配合日料，特别要保证必需氨基酸、维生素和微量元素的平衡。
感染的鸡可表现毒血症。因此，采血和注射疫苗用的注射器及其他器械在使用中要消毒。如在同一鸡场有感染和非感染鸡群，应将孵化器、人员和运输工具分开。一定要将要使用的蛋盘和孵化器分开，并将孵化时间错开。最少也要将孵化厅、鉴别性别和免疫注射分开(这不是推荐的方法)，先清洁健康鸡群，在此之前不要对潜伏感染的雏鸡做任何事情。尤其重要的是将原种或祖代的感染和非感染种群分开，它们的蛋不要在同一孵化室孵化。
在某些地区，尤其是在鸡能喝到水库、湖泊、河水的地方，EDS的感染可能更普遍。采用饮井水或对水进行氯处理，可控制这种疫情。在养鸭和鹅的地方，应注意将其与鸡分开。如有可能所有鸡舍应配有防野鸟进入装置。已证实野鸭、野鹅常被感染，但还不知其他禽种的感染情况。
6.2根除
在北爱尔兰的一个种鸡场已成功地消除了EDS76。其方法是基于下列假设：①从感染的蛋孵出的鸡可能处于潜伏感染下，并且不产生抗体。②在产蛋高峰病毒暴露出来并排泄，这时产生抗体，抗体将预防或减少排毒。③水平传播很差。
清除措施是在40周龄以上原种和祖代鸡群中进行。在这时鸡已产完了异常蛋并有了抗体。从这些正常蛋孵出的雏鸡分成大约100个小组中(用铁丝网隔开)，间隔大约6周，对10%～25%的鸡进行HI检测，如出现1～2只反应者，将其去除。此圈及相邻圈的鸡以后每周100%检两次。如发现较多反应者或反应者在一个圈时，整圈都要去除，并对相邻圈进行重检。在40周龄时，对全部鸡进行检验，进行鸡蛋作为下一世代的种蛋。这种措施是成功的，结果祖代和父母代鸡群中没有发生感染。英国等科学认为，扑杀血清反应阳性鸡是消灭本病的根本措施，可以防止通过蛋禽垂直传播，其余的鸡注射疫苗预防之。
6.3免疫与疫苗
预防接种是本病主要的防制措施，国外已采用单价或双价苗预防，单价苗多为灭活苗。英国、南斯拉夫、西德、日本均已制成疫苗用于预防。应用较多的是BC14毒株油剂甲醛苗，该苗接种18周龄后的母鸡，经肌肉或皮下接种0.5mL，15d后产生免疫力，抗体可维持12～16周，以后开始下降，40～50周后抗体消失。在匈牙利，用B8/78株病毒制备的灭活苗，免疫后3周，95%的免疫鸡HI抗体可达最高峰。
近些年，开展了EDS病毒127和鸡新城疫灭活二联油佐剂苗的研制，取得较好效果。如Bouquet等用EDS病毒127株细胞培养物和新城疫毒株的鸡胚尿囊液，经β-丙酸内意灭活后制成，对17～18周龄鸡接种表明，该苗有较好的保护作用和安全性。A.Zanella(1980)制成的二联灭活苗，接种于16～20周龄的蛋用鸡，其ND和EDS的HI抗体滴度可达27至210，至少在1年内可抵抗这两种强毒的攻击。我国台湾大丰兽疫血清股份有限公司，自1980年以来制的ND-EDS二联油佐剂灭活苗，接种鸡群后没有不良影响，在接种25周后用ND和EDS强毒攻击，证明效果良好。
Kozlina等(1988年)对40只18周龄鸡接种鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病和EDS四联灭活苗，对这四种病均获得良好免疫力。Holmes等(1989)对一群18周龄商品蛋鸡接种新城疫、传染性支气管炎和EDS三联灭活苗经44周后检测，对这三种病仍显示HI抗体阳性，且在攻毒后与对照组相比仍保持产蛋正常。
谈建明、马式虹等制备EDS尿囊液病毒，经甲醛溶液灭活后，按一定比例加入span、白油制成的油佐剂灭活，免疫3周后，HI抗体水平达9.5log2，对小白鼠、豚鼠、家兔及鸡均无不良反应。用该苗与国内外其他苗进行免疫保护对比试验，在20周龄免疫，28周龄时用强毒攻击，结果四组免疫鸡均未发病，而非免疫对照组产蛋率从91.7%急剧下降到60.7%，同时伴有大量畸形蛋、薄壳蛋、软壳蛋及蛋壳退色。
王永坤等于1991年就研制成功了EDS76单价和EDS-ND、EDS76—ND—IB等多联油佐剂灭活苗研制了多批油乳佐剂灭活苗，免疫后4～7周HI抗体滴度可达10～11log2，对120余万只鸡的使用证明，胸肌注射0.5mL具有安全性良好的免疫原性。免疫鸡群经强毒攻出试验表明，当免疫鸡群HI达1∶8以上时，体内各器官检测不到感染的病毒，相反，当鸡群HI价低于1∶8时，则在口咽粘膜、脾脏、输卵管和卵巢中不同程度都能检测到带毒量。
种鸡场发生本病时，无论是病鸡群还是同一群场其它鸡生产的雏鸡，都不能否定垂直感染的可能，即使这些雏鸡在开产前抗体阴性，也不能作为没有垂直感染的证明，因为开产前病毒才活动，使鸡发病，才有抗体产生。所对这些鸡必须注苗。在开产前3～4周进行免疫接种。
此外，对病鸡补充维生素丰富的饲料，改善营养条件，并添加适量的抗生素，有一定辅助疗效和控制继发细菌感染。